高架十字迷宮的實(shí)驗(yàn)步驟介紹
點(diǎn)擊次數(shù):744 更新時(shí)間:2022-12-20
高架十字迷宮是另外一個(gè)特定的行為試驗(yàn)范式。迷宮包括兩個(gè)開放臂和兩個(gè)封閉(墻體遮蔽)臂。該試驗(yàn)利用動(dòng)物對(duì)敞開環(huán)境的恐懼以及對(duì)新環(huán)境的探究特性之間的矛盾來考察動(dòng)物的焦慮狀態(tài)。焦慮程度高的動(dòng)物比焦慮程度低的動(dòng)物更傾向于在封閉臂內(nèi)逗留更長的時(shí)間。
高架十字迷宮(the elevated plus maze,EPM)是評(píng)價(jià)嚙齒類動(dòng)物焦慮反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法,相較傷害性刺激所致小鼠焦慮行為檢測(cè)(如電刺激、噪聲刺激、飲食剝奪和暴露在捕食者氣味等),該實(shí)驗(yàn)具有操作簡單的優(yōu)點(diǎn),能直觀反映小鼠的條件應(yīng)答。EPM實(shí)驗(yàn)是在高架Y型迷宮的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的。EPM由開臂(open arms和閉臂(closed arms)各兩條組成,呈十字形交叉,交義部分為中央?yún)^(qū),距地面有一定高度。其原理是由于面對(duì)新事物開臂小鼠會(huì)產(chǎn)生好奇心去探究,而它們有嗜暗的天性(閉臂),兩者之間發(fā)生探究與回避的沖突行為,產(chǎn)生焦慮心理。整個(gè)迷宮距離地面的高度相當(dāng)于人類站在懸崖邊,易導(dǎo)致動(dòng)物產(chǎn)生恐懼不安的心理??梢酝ㄟ^對(duì)比小鼠在開臂和閉臂內(nèi)的滯留時(shí)間和路程來評(píng)價(jià)小鼠的焦慮行為。
EPM實(shí)驗(yàn)在藥物開發(fā)和研究中得到廣泛的應(yīng)用:主要用于苯二氮卓類藥物的抗焦慮作用研究及篩選具有抗焦慮作用的新藥,也被用于研究精神性藥物濫用的影響及激素的功能,應(yīng)激對(duì)生殖、衰老、妊娠的影響等。抗焦慮藥主要選擇性地抑制邊緣系統(tǒng)的海馬、杏仁核,產(chǎn)生抗焦慮作用。
高架十字迷宮的實(shí)驗(yàn)步驟:
1、實(shí)驗(yàn)之前,一定要確保高架十字迷宮整個(gè)裝置的清潔。這個(gè)步驟不僅僅是要求當(dāng)天的初次實(shí)驗(yàn),更加側(cè)重于每一次動(dòng)物實(shí)驗(yàn)完成后的清潔除味工作,一定要去除上一只動(dòng)物在宮體內(nèi)遺留下來的尿液、糞便等,盡可能創(chuàng)造一個(gè)清潔、無味道的理想試驗(yàn)環(huán)境。同時(shí),實(shí)驗(yàn)員需要記錄動(dòng)物的編號(hào)、日期、狀態(tài)等信息;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提前運(yùn)送到行為學(xué)實(shí)驗(yàn)室專用臨時(shí)籠架,
適應(yīng)環(huán)境至少3H左右,減少動(dòng)物緊張。
2、將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠或者小鼠)從飼養(yǎng)籠中取出,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物盡量背向?qū)嶒?yàn)員,將動(dòng)物輕輕放在儀器宮體的中央?yún)^(qū)域,動(dòng)物面向開臂,然后實(shí)驗(yàn)員迅速安靜的離開;
3、打開SuperMaze或者VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件,跟蹤動(dòng)物在高架十字迷宮儀器內(nèi)的軌跡運(yùn)動(dòng),自動(dòng)計(jì)算指標(biāo),通常實(shí)驗(yàn)時(shí)長為5min;
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,取出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,放入飼養(yǎng)籠,做好實(shí)驗(yàn)完成動(dòng)物的標(biāo)記信息,同時(shí),用酒精和紙巾清潔迷宮。